프로젝트 지원 방식
표지 계획은 표적 분자, 반응 가능한 위치, 표지 물질, 표지량, 정제 및 표지 후에도 목적 기능을 유지하는지 확인할 시험을 정의해야 합니다.
접합과 probe 성능 구분
NHS 에스터, 말레이미드, azide-cyclooctyne 및 tetrazine-TCO 반응은 선택성, 조건, 속도, 안정성, 입체 크기 및 생성물 불균일성이 다릅니다. 표적의 가용 작용기와 필요한 위치 제어에 따라 반응을 선택합니다.
공유 결합 형성만으로 영상이나 분석 적합성이 입증되지는 않습니다. 최종 접합체에서 표지 정도와 분포, 유리 표지 물질, 응집, 결합, 신호, 배경 및 안정성을 측정해야 합니다. 항체 표지 연구는 표지량 증가가 활성 항체 비율을 낮출 수 있음을 보여줍니다.
일반적인 표지 워크플로
표적과 평가 지표 정의
단백질, 펩타이드, 올리고뉴클레오타이드, 지질, 고분자, 입자 또는 표면과 예정 분석를 지정합니다.
반응 위치 파악
Amine, 티올, azide, alkyne, cyclooctyne, tetrazine, TCO, 태그 또는 도입 잔기와 기능 핵심 위치를 기록합니다.
표지 물질와 반응 쌍 선택
정확한 형광 염료, 비오틴, 친화도 태그, 킬레이트제 또는 기타 표지 물질를 정하고 조건에 맞춥니다.
표지량 설정
목표 표지 정도 또는 점유율과 시약 당량 범위를 계획합니다. 최대 도입량이 항상 최선은 아닙니다.
반응 및 정제
반응 순서, 반응 정지, 유리 표지 물질 제거, 완충액 교환, 빛 및 민감한 작용기를 관리합니다.
최종 probe 특성 확인
동일성, 순도, 표지 비율과 분포, 유리 표지 물질, 응집, 신호, 결합 또는 기능 및 안정성을 측정합니다.
소재 선정 전에 필요한 정보
표적 분자
동일성 또는 구조, 농도, 양, 제형, 작용기 및 pH, 용매, 온도, 금속, 빛 민감도.
위치와 표지량
Random 또는 위치 선택적 전략, 원하는 표지 수, 보호할 위치 및 허용 불균일성.
표지 물질
정확한 형광 염료, 비오틴 유도체, 친화도 작용기, 킬레이트제 등. 여기·방출 파장만으로 물질을 정할 수 없습니다.
반응·정제 제약
완충액, 첨가제, 용매, 농도, 온도, 시간, 정제법 및 최종 제형.
합격 시험
표지 비율, 순도, 유리 표지 물질 한도, 기능 유지, signal-to-background 및 안정성.
이 페이지의 범위
이 페이지는 반응성 작용기, 스페이서 포함 시약, 형광 염료/비오틴-ready 중간체 및 맞춤 표지 전구체를 다룹니다. 수율, 위치 선택성, 표지 정도, 형광 성능, 결합 유지, 영상 해상도, 진단 용도, in vivo 적합성, 안전성 또는 규제 상태를 의미하지 않습니다.
관련 제품 카탈로그 및 기술 페이지
참고 문헌
- 1.A strain-promoted [3 + 2] azide-alkyne cycloaddition for covalent modification of biomolecules in living systems (Journal of the American Chemical Society, 2004)
- 2.Tetrazine ligation: fast bioconjugation based on inverse-electron-demand Diels-Alder reactivity (Journal of the American Chemical Society, 2008)
- 3.Fluorescent-labeled antibodies: Balancing functionality and degree of labeling (Analytical Biochemistry, 2010)
- 4.Site-Specific Fluorescent Labeling of Hemagglutinin-Specific Antigen Binding Fragment through Amine Chemistry Revealed by Mass Spectrometry (Analytical Chemistry, 2023)